国家生物信息中心徐晨欢研究组展现转录因子在自然染色质上的动态量化特征
转录因子在染色质上的单次驻留时间通常为几秒至几十秒。驻留时间的动态转变会影响基因转录或染色质高级结构。使用甲醛交联来牢靠细胞核中卵白质-DNA相互作用的染色质免疫共沉淀（ChIP）手艺是检测转录因子在染色质上驻留水平的常用要领。然而 ，通常一连10分钟的甲醛交联会以累积的方法牢靠短时的转录因子-DNA相互作用 ，从而扭曲转录因子在差别团结位点驻留时间的差别 ，扰乱对转录因子真实驻留水平的测定。在未经任何化学交联的自然染色质（native chromatin）上测定转录因子的驻留能力 ，有助于剖析更量化的转录因子动态驻留特征及其生物学意义。
5月14日 ，国家生物信息中心徐晨欢研究组在Molecular Systems Biology?期刊在线揭晓了题为“A continuum of zinc finger transcription factor retention on native chromatin underlies dynamic genome organization”的研究论文。该研究基于优化的微球菌核酸酶（MNase）消化 ，开发了loMNase-seq和N-ChIP手艺 ，以高区分率转录因子足迹（footprint）的形式 ，划分测定了自然染色质上全局或特定转录因子（CTCF、MAZ、ZNF143等）的驻留位点与驻留水平。
单次ChIP实验只能提供特定实验条件下染色质上转录因子驻留的信息。使用自然染色质可以实时响应外部情形、动态转变的特征 ，研究职员在一连增强的NaCl浓度下开展了一组N-ChIP实验 ，发明一连增强的盐浓度可以实现从自然染色质上一连“剥离”转录因子CTCF或MAZ的团结 ，体现为更高盐浓度的N-ChIP捕获的转录因子驻留位点是更低盐浓度N-ChIP捕获的转录因子驻留位点的子集。使用在这个盐浓度梯度下测定的自然染色质上CTCF的团结信号 ，研究职员进一步建设了差别CTCF基序（motif）的“耐盐得分”——S-score ，作为反应CTCF卵白在自然染色质差别基序上实时驻留能力的量化指标。与从交联ChIP ，以及其它自然染色质相关实验（CUT&RUN ，CUT&Tag等）获得的CTCF量化驻留信息相比 ，S-score可以更好地诠释这些CTCF基序的序列特征、CTCF驻留对锌离子剥夺等应激条件的耐受能力 ，以及由这些CTCF基序介导的染色质环（chromatin loops）等高级结构在锌离子剥夺条件下的差别稳固性。这充分展现了使用N-ChIP手艺在自然染色质上研究染色质高级结构实时转变纪律的重大优势。
综上 ，该研究定量测定了CTCF、MAZ等转录因子在自然染色质上的驻留水平 ，展现了自然染色质上转录因子的差别驻留水平是染色质高级结构动态特征的基础 ，为转录因子调控领域的研究提供了两个新的实验工具 ，以及一套以递增盐浓度为基础的定量剖析要领。
国家生物信息中心徐晨欢研究员为本文的通讯作者 ，博士研究生胡思玲和刘扬影为本文的配合第一作者。该研究获得了国家自然科学基金、国家重点研发妄想等项目的资助。
自然染色质上转录因子的差别驻留水平组成染色质高级结构动态特征的基础
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